We delen graag de volgende studies, die eind augustus werden gepresenteerd op het ESVD-ECVD-congres in Lille. Het belangrijkste hoogtepunt is de poster “Analytical Performance of Three Canine Serum Allergen Tests Evaluated Using Artificial Sera with Predefined Allergen-Specific Canine IgE Monoclonal Antibodies,” die de analytische prestaties van drie serologische allergeentests bij honden systematisch vergelijkt. Daarnaast werden tijdens het Cutting Edge Program op donderdag 27 augustus nog drie presentaties gegeven, die de bevindingen over allergeenspecifieke IgE-diagnostiek verder onderbouwen.
De poster: analytische validatie van drie serologische allergeentests
De poster is geschreven door Freja Krogh en Lene Boysen (Vetgruppen Birkerød Dyrehospital, Denemarken), met financiële steun van Nextmune AB, de Deense Vereniging voor Veterinaire Dermatologie en Vetgruppen Birkerød Dyrehospital. Het onderzoek richt zich op een methodologisch probleem dat inherent is aan vergelijkend onderzoek naar serumallergenentests (SAT): omdat bij honden met een natuurlijke sensibilisatie de IgE-samenstelling onbekend is, kunnen afwijkende resultaten tussen laboratoria niet met zekerheid worden toegeschreven aan werkelijke biologische variatie of aan een analytisch artefact van de gebruikte testmethode.
Om dit op te lossen, maakten de auteurs gebruik van een gecontroleerde proefopzet. Kunstmatige sera (van IgE ontdaan foetaal runderserum) werden verrijkt met in het laboratorium geproduceerde, allergeenspecifieke monoklonale IgE-antilichamen van honden tegen drie gedefinieerde allergenen: Phl p 5 (Phleum pratense, timotheegras), Der f 2 (Dermatophagoides farinae) en Pla a 3 (Platanus). Er werden elf sera met een vooraf bepaalde IgE-samenstelling bereid, waaronder één negatieve controle bestaande uit Der f 2-specifiek IgG-B (IgG1) van honden, om te testen of de testen ten onrechte IgG detecteren. De monsters werden gecodeerd, geanonimiseerd en gerandomiseerd, waarna ze door een onafhankelijke externe onderzoeker werden ingediend bij drie Europese laboratoria, die elk een andere testmethodologie gebruikten: PAX (Nextmune AB, Zweden; moleculaire allergologie multiplex macroarray), MAC (IDEXX Laboratories, Hoofddorp; ELISA met een cocktail van monoklonale antilichamen) en Allercept (LABOKLIN, Bad Kissingen; op de Fcε-receptor gebaseerde ELISA). De resultaten werden geïnterpreteerd volgens de drempelwaarden van de fabrikanten en vergeleken met de vooraf gedefinieerde IgE-samenstelling aan de hand van sensitiviteit, specificiteit, overeenstemmingspercentage, Cohen’s kappa en variatiecoëfficiënt (CV%).
Resultaten
De drie testmethoden verschilden significant in hun vermogen om de vooraf gedefinieerde IgE-profielen correct te reproduceren. PAX classificeerde alle 11 sera correct (100% sensitiviteit, 100% specificiteit, κ = 1,0; volledige overeenstemming). MAC classificeerde 3 van de 11 monsters correct, met een sensitiviteit van 33%, een specificiteit van 100% en een matige overeenstemming (κ = 0,353). Allercept classificeerde 2 van de 11 monsters correct en vertoonde zowel vals-negatieve als vals-positieve reacties, wat resulteerde in een sensitiviteit van 70%, een specificiteit van 42% en een slechte overeenstemming (κ = 0,113). De negatieve controle werd door zowel PAX als MAC correct als negatief gerapporteerd, terwijl positieve reacties op de negatieve controle bijdroegen aan de lagere specificiteit van Allercept.
De intra-assay-reproduceerbaarheid werd kwantitatief beoordeeld aan de hand van vier serummengsels met identieke, lage concentraties specifiek IgE tegen hetzelfde allergeen. PAX vertoonde een lage variatiecoëfficiënt (1,8–7,4%), terwijl zowel MAC als Allercept een significant hogere variatie vertoonden (respectievelijk 144,2% en 200%), wat wijst op een slechte reproduceerbaarheid bij lage IgE-concentraties.
Interpretatie en klinische relevantie
De auteurs concluderen dat SAT-methoden analytisch niet onderling uitwisselbaar zijn. Vals-negatieve resultaten kunnen ertoe leiden dat relevante allergenen ten onrechte worden weggelaten uit allergeenspecifieke immunotherapie (ASIT), terwijl vals-positieve resultaten kunnen leiden tot het onterechte opnemen van irrelevante allergenen. De superieure prestaties van de op moleculaire allergologie gebaseerde test (PAX) worden toegeschreven aan het gebruik van gedefinieerde allergeencomponenten, in tegenstelling tot ruwe allergeenextracten, waarbij variatie in samenstelling en lage concentraties van relevante componenten waarschijnlijk bijdragen aan de verminderde gevoeligheid van de op extracten gebaseerde testen (MAC en Allercept).
Een belangrijk sterk punt van deze studie is het gebruik van sera met een vooraf gedefinieerde, monoklonale IgE-samenstelling, waardoor een directe nauwkeurigheidsbeoordeling mogelijk is die niet haalbaar is met natuurlijk gesensibiliseerd hondenserum. De gecodeerde, geblindeerde en gerandomiseerde aanlevering van monsters minimaliseert het risico op interpretatiebias. De auteurs merken als beperking op dat kunstmatig serum mogelijk niet volledig de biologische complexiteit van natuurlijk gesensibiliseerd hondenserum weerspiegelt, en dat verder onderzoek nodig is om te bepalen hoe deze bevindingen zich vertalen naar de klinische praktijk. Klik hier om de poster te bekijken.
Overige presentaties op het congres
Tijdens het Cutting Edge-programma op donderdag 27 augustus werden drie aanvullende vrije mededelingen gepresenteerd, eveneens gebaseerd op grootschalige PAX-datasets:
Olivry en Mas-Fontao analyseerden allergeenspecifieke IgE-reacties op bijengif (Api m) en wespengif (Ves v) bij 34.151 honden, 5.810 katten en 4.612 paarden die in 2025 in heel Europa met PAX werden getest. Tests met componentresolutie brachten aanzienlijke afwijkingen aan het licht ten opzichte van de resultaten op basis van extracten: 40–59% van de dieren die positief testten op een component van bijengif, testte negatief op het oorspronkelijke extract, en 63–75% op wespengif. De bevindingen ondersteunen de routinematige integratie van componentgespecificeerde diagnostiek in de klinische praktijk, naast de geografische clustering van sensibilisatiepatronen in heel Europa.
Börjesson, Streets en Olivry onderzochten de seizoensgebonden variabiliteit van pollen- en mijt-specifiek IgE bij Scandinavische honden (n = 5.014 PAX-resultaten, maart 2023–februari 2024). De seropositiviteit voor boom- en onkruidpollen bereikte een piek in de lente en zomer, terwijl de seropositiviteit voor huisstofmijten significant hoger was in de herfst en winter, met een tegengesteld patroon voor opslagmijten. De auteurs concluderen dat het tijdstip van de serologische bemonstering van belang is voor de interpretatie van de testresultaten. Deze studie is open access gepubliceerd (doi.org/10.3390/vetsci13060522).
Olivry en Mas-Fontao hebben soortspecifieke sensibilisatieprofielen voor huisstofmijten (Dermatophagoides farinae en D. pteronyssinus) bij honden, katten en paarden gekarakteriseerd. Er werden duidelijke verschillen op moleculair niveau vastgesteld: katten vertoonden een hogere seropositiviteit voor Der f 1, honden voor Der f/p 2 en Der p 11, en paarden voor Der p 5, 7, 10, 21, 23 en Der f 15. Ook de seizoensdynamiek verschilde per diersoort: bij honden was er een piek in de zomer en bij paarden in de herfst, terwijl katten de minste seizoensvariatie vertoonden.
Conclusie
Samen onderstrepen de vier studies die op dit congres werden gepresenteerd het belang van methodologische keuzes bij allergeenspecifieke IgE-diagnostiek: van de analytische betrouwbaarheid van de testmethode zelf, tot de toegevoegde waarde van componentgespecificeerde diagnostiek, tot het effect van het tijdstip van bemonstering op de testresultaten. De poster van Krogh en Boysen levert hiervoor het meest directe bewijs, aangezien dit de eerste studie is waarin de analytische nauwkeurigheid van drie SAT-methoden is gekwantificeerd met behulp van sera met een bekende, in plaats van veronderstelde, IgE-samenstelling.
